蛋白快速銀染試劑盒

產品簡介：

蛋白快速銀染試劑盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一種快速的可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白銀染染色的試劑盒，該試劑盒含有增敏步驟，可明顯降低背景。其優點還在于：1、操作簡單、快速；2、可用于2D凝膠的銀染，并可進行后續的質樸檢測；3、目的條帶清晰；4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit與Protein Silver Stain Kit相比，前者操作速度更快，但檢測靈敏度可能低于后者，尤其是在檢測小分子量蛋白質的時候。本試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

 產品組成：

自備材料：

水平搖床或側擺搖床

去離子水(超純)

乙醇、冰乙酸

操作步驟(僅供參考)：

準備工作：以下操作以8.5×5.5cm、厚度為1.0mm的凝膠為例，以凝膠全部浸沒到溶液為準，一般用量是25ml，對于凝膠體積較大的，各溶液的使用量需按凝膠體積比例放大。整個銀染過程應在搖床上進行，搖床轉速控制在60～70rpm。提前配制固定液，即按無水乙醇:冰乙酸:去離子水=5:1:4的比例配制。提前配制洗滌液，即按無水乙醇:去離子水=1:4的比例配制。

2、水洗：電泳結束后，取凝膠放入去離子水中清洗2次，每次5min。

3、固定：取凝膠放入50～100ml固定液中，在搖床上室溫搖動15～20min，重復固定步驟1次。

4、洗脫：取凝膠放入洗滌液中清洗2次，每次5min。

5、水洗：去離子水清洗凝膠2次，每次5min。

6、增敏：配制銀染增敏工作液，即取Silver Stain Sensitizer(500×)0.1ml加入到50ml去離子水中，混勻，即1×Silver Stain Sensitizer，一般應2h內用完。室溫下用1×Silver Stain Sensitizer孵育凝膠2min，立即用去離子水清洗凝膠2次，每次1min。

7、銀染：配制銀染工作液，即取Silver Stain(100×)0.5ml加入到50ml去離子水中，混勻，即得1×Silver Stain，一般應2h內用完。取凝膠入1×Silver Stain，在搖床上室溫搖動10～20min。

8、水洗：棄液，在搖床上用去離子水清洗凝膠2次，每次30s，搖動速度在60～70rpm?？偟乃磿r間應控制在1.5min內。

9、顯影：配制銀染顯影工作液，即取Silver Stain Developer(5×)10ml加入到40ml去離子水中，混勻，即1×Silver Stain Developer，一般應30min內用完。清洗凝膠后，立即置于1×Silver Stain Developer中，室溫孵育2～10min，直至蛋白條帶清晰可見。一般顯色30s后就會出現棕色沉淀，繼續顯影2～3min，亦可延長至5min以上，如果顯影效果不佳，可重新更換1×Silver Stain Developer繼續顯影。

注意事項：

1、背景過深：①顯色時間過長；②洗滌不充分；③凝膠中殘留物質未去除干凈；④去離子水的純度過低。

2、蛋白條帶較淺：①蛋白的半胱氨酸含量過低；②銀染后水洗時間過長；③蛋白量較低；④固定后的洗滌時間不夠，導致乙酸殘留。

3、凝膠上出現雜質或非蛋白的印跡：①凝膠沒有被充分浸沒，應加入足量溶液；②容器沒有清洗干凈；③凝膠接觸金屬物質；④指紋或其他壓跡。

4、本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時請作必要防護。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期： 6個月有效。