產品介紹
Sybr Green II (10,000× DMSO溶液，電泳級)
本品用DMSO溶解，因DMSO的熔點是18.5℃，使用前請放置到室溫充分溶解。
Sybr Green II核酸染料特點
● 無毒性：屬花箐類染料，容易生物降解，無致癌毒性。
● 靈敏度高：至少可檢出20pg ssDNA或RNA，高于EB染色法25～100倍。
● 信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。
● 操作簡單：與 EB 一樣，在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。
● 適用范圍廣：可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯 酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等;可用于 ssDNA 或 RNA 染色。
● 使用方便：對分子生物學中常用的酶(如：Taq 酶、反轉錄酶、內切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。
● 經濟：價格比銀染便宜。
Sybr Green II使用方法簡介
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時加入Sybr Green II 核酸染料。冷卻膠至50℃左右，每100mL膠中加入3～5μL Sybr Green II 10,000× 儲液，以此比例類推。
(2) 按照常規方法進行電泳。
注意事項：
(1) 此方法染色可以準確確定核酸片段分子量，染料用量相對較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。
(2) 由于Sybr Green II熱穩定性較差，不能在熱的膠溶液中直接添加，需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。
2.泡染法
(1) 按照常規方法進行電泳。
(2) 用pH 7.0～8.5 的緩沖液(如：TAE，TBE 或 TE)，按照10000﹕1的比例稀釋Sybr Green II 10,000× 儲液，混勻，制成1× 染色液。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10～30分鐘，染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色，將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上，讓其均勻地覆蓋整個膠板，并染色30分鐘。玻璃平皿必須預先經過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注：用泡染法染色時，可以**確定核酸片段分子量。但染料用量較多。
